Inmunolocalización de inmunoglobulina g durante el proceso de adhesión dentinaria

Abstract

Antecedentes: La odontología adhesiva se fundamenta en la infiltración de resinas hidrofílicas entre las proteínas colágenas dentinarias para la formación de la zona híbrida y tags de resina intratubulares. Sin embargo, la interacción entre las inmunoglobulinas del fluido dentinario y los sistemas de adhesión no ha sido investigada. Objetivo: Probar la hipótesis que existe asociación morfológica entre las inmunoglobulinas intratubulares con la superficie dentaria acondicionada “in vivo” y con los adhesivos dentinarios durante el proceso de hibridización de la dentina. Materiales y métodos: Bajo consentimiento informado, se seleccionaron 10 terceros molares superiores o premolares sanos con indicación terapéutica de extracción. Luego del bloqueo anestésico, se realizaron cavidades oclusales de 3mm de profundidad, 3mm de extensión mesio-distal y 2mm de extensión vestíbulopalatino, mediante instrumental rotatorio de alta velocidad y refrigeración constante. Utilizando aislación relativa del campo operatorio, la dentina cavitaria se acondicionó con ácido ortofosfórico gel al 37% durante 15 segundos y se lavó con agua corriente. El exceso de humedad fue retirado mediante discos de papel filtro estéril. Luego de 5 minutos de espera, se realizaron las extracciones y los especímenes fueron fijados en metacarnoy. La dentina de cada cavidad se incubó con un anticuerpo policlonal anti-Inmunoglobulina G (IgG) humana. La reacción antígenoanticuerpo se evidenció mediante el Sistema Biotina-Streptavidina-PeroxidasaDiaminobencidina. Las cavidades operatorias inmunomarcadas se observaron y fotografiaron mediante microscopia estereoscópica. Posteriormente, se realizó técnica adhesiva utilizando Adper Single Bond 2 (3M) y como marcador el fluorocromo Rodamina B. Los especímenes se desmineralizaron y se incluyeron en parafina histológica. Se realizaron cortes de 6 µm de grosor los cuales fueron observados mediante microscopía de campo claro y epifluorescencia utilizando un microscopio Zeiss AxioStar. Resultados: Se observó inmunoreacción positiva en la superficie de la dentina de la pared pulpar y paredes laterales de las cavidades operatorias. El análisis histológico demostró que la inmunoreacción se detecta en la matriz intertubular superficial y en la entrada de los túbulos dentinarios acondicionados por el ácido. Se detectó que la inmunoreacción superficial para IgG queda inmersa en el espesor del adhesivo polimerizado que conforma la zona híbrida y se asocia con la formación de tags de resina intratubulares. Conclusión: La IgG presente en el fluido dentinario que humecta las superficies dentinarias cortadas durante los procedimientos operatorios “in vivo” se mantiene adherida a la matriz dentinaria acondicionada, incorporándose a la formación de la zona híbrida modulando la formación de los tags intratubulares. Palabras clave: Inmunoglobulina G, Adhesión, Dentina, Inmunohistoquímica